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HIPERTENSIÓN / 2016 / VOL. 21
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1) Función de NGAL y las Células Dendríticas en el Remodela-
miento Cardiovascular Inducido por Aldosterona
Buonafine M
1
, Araos P
2
, Gravez B
1
, Pacheco R
3
, Michea L
2
, Jais-
ser F
1
,
Amador C
4
,
1
INSERM UMRS 1138 Team 1 Université Pie-
rre et Marie Curie.
2
Instituto Milenio de Inmunología e Inmuno-
terapia, Facultad de Medicina, Universidad de Chile.
3
Laboratorio
de Neuroinmunología Fundación Ciencia & Vida.
4
Instituto de
Ciencias Biomédicas, Facultad de Ciencias de la Salud, Universi-
dad Autónoma De Chile.
Introducción:
La activación del Receptor de Mineralocorticoides
(MR) induce inflamación y fibrosis cardiovascular (CV). La Lipo-
calina Asociada a Gelatinasa de Neutrófilos (NGAL) es un blanco
de señalización MR en tejido CV, y posee un papel crítico en la
hipertensión y la fibrosis dependiente de aldosterona (Aldo). Se
desconoce si la activación del MR en células inmunes es parte
del mecanismo de daño CV en la hipertensión. Nuestro objetivo
fue caracterizar la expresión basal de NGAL en distintos tipos de
células inmunes, y estudiar si la activación del MR en células den-
dríticas (DCs) induce NGAL y es crucial en el remodelamiento CV.
Métodos:
Ratones
Wild-Type
(WT) se trataron con Aldo (200μg/
kg/d) y sal durante 28 días (NAS). Linfocitos T-CD4
+
, T-CD8
+
, lin-
focitos B, DCs y macrófagos (Mø) se aislaron desde bazo. Rato-
nes CD11c.DOG se utilizaron para estudiar la importancia de las
DCs en el remodelamiento CV. DCs WT y NGAL-KO se incubaron
con Aldo (100nM, 24hr) para estudiar la activación del MR.
Re-
sultados:
NAS elevó la presión arterial sistólica (123mmHg
vs.
Control 101±6mmHg, p<0.05), e indujo hipertrofia cardiaca. Adi-
cionalmente, NAS aumentó el reclutamiento de linfocitos T-CD8
+
activos, de linfocitos B y de granulocitos en nódulos linfáticos.
El mRNA basal de NGAL fue mayor en DCs y Mø, con respecto a
los linfocitos. Estos niveles de NGAL aumentaron en DCs y Mø
aislados de ratones NAS (>3-veces vs. Control, p<0.05 mRNA).
La ausencia de DCs en ratones CD11c.DOG previno la hipertrofia
cardiaca y la fibrosis perivascular en ratones NAS, lo que correla-
cionó con unamenor inducción del mRNA de NGAL, colágeno-1a1
y CTGF. La activación del MR en DCs indujo sobreexpresión de
NGAL, TGF-β1 e IL-23 (n=4, p<0.05). La ausencia de NGAL en DCs
previno el aumento de TGF-β1 e IL-23, ante el tratamiento con
Aldo.
Conclusión:
Las DCs y NGAL tendrían un papel fundamental
en la activación del sistema inmune que conduce a la fibrosis CV
durante la hipertensión por Aldo.
INSERM,
Fibrotarget Netwok,
FONDECYT de Iniciación 11150542,
FONDECYT Regular 1130550 e Instituto Milenio en Inmunología
e Inmunoterapia P09/016-F.
2) Eliminación de Células Dendríticas aumenta la natriuresis
en ratones tratados con Angiotensina II y dieta rica en sal
Araos P
1
, Hevia D
1
, Prado C
2
, Pacheco R
3
, Michea L
1
,
1
Millennium
Institute on Immunology and Immunotherapy, CEMC, ICBM,
Facultad de Medicina Universidad De Chile.
2
Laboratory of Neu-
roimmunology Fundación Ciencia & Vida..
3
Fundación Ciencia &
Vida Laboratory of Neuroimmunology.
Angiotensina II (AngII) y dieta rica en sal (HS) causan Hiperten-
sión (HTA), inducción de los transportadores de sodio renales y
disfunción endotelial. Nuestro estudios previos mostraron que
la eliminación de células dendríticas (DCs) en ratones, previene
el desarrollo de hipertensión en repuesta a AngII+HS. Nuestra
hipótesis es que la eliminación de DCs mejora la natriuresis de
ratones AngII+HS.
Ratones Wild type (WT) y transgénicos CD11c.DOG (que permi-
ten la eliminación de las DCs mediante inyección de toxina dif-
térica, DT) fueron separados en 3 grupos experimentales (14d):
AngII+HS (AngII=1,042 μg/Kg/min), AngII+HS+DT (DT=8ng/g) y
control (vehículo). Se analizó la presión arterial (manguito en la
cola y telemetría) y natriuresis. También evaluamos la natriuresis
luego de la inyección de solución NaCl fisiológico (10% del peso
del animal, 4h, Test salino, TS, 4d). Evaluamos la contractilidad
arterial de anillos aórticos (fenilefrina, potasio y función endo-
telial, 14d).
La inyección de DT previno el aumento de la PAS en ratones
CD11c tratados con AngII+HS en comparación a AngII+sal (WT
o CD11c) o WT tratados con AngII+HS+DT. Estudios telemétricos
confirmaron el aumento de la PAS de los ratones CD11c trata-
dos con AngII+HS (PAM=144±21 mmHg; PAS=160±26 mmHg,
al día14), esto, fue prevenido al eliminar las DCs (PAM=92.7±20
mmHg y PAS=104±26 mmHg). El tratamiento AngII+HS aumen-
tó la natriuresis de 24h en comparación a ratones control (19±7.6
vs. 5.3±1.7 μEq/g de ratón); la eliminación de DCs aumenta aun
más la natriuresis (30±7.9 μEq/g de ratón; n=5; P<0.05). AngI-
I+HS aumentó la natriuresis post-TS en animales WT y CD11c día
4. Sin embargo la eliminación de DCs, en ratones CD11c, incre-
menta en un 27% la natriuresis (P<0.05). El tratamiento AngII+HS
causó disfunción endotelial en todos los grupos experimentales.
Los resultados sugieren que la eliminación de DCs previene el de-
sarrollo de HTA por AngII+HS ya que mejora la natriuresis.
FONDECYT1130550, IMII P09-016-F, BECA CONICYT 21130482